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模型建立:
东莨菪碱属于胆碱能拮抗药物,能穿过血脑屏障,抑制乙酰胆碱与受体结合,引发中枢胆碱系统紊乱,造成动物短期学习记忆障碍,可模拟AD患者行为的异常表现。向小鼠腹腔单次或多次注射东莨菪碱可引起脑内乙酰胆碱(ACh)水平显著下降,诱导AD动物模型。单次给药30min后即可出现明显学习记忆障碍,连续注射4周后,大鼠脑内Aβ和异常磷酸化Tau蛋白含量明显升高。
应用:适用于研究AD模型中的认知障碍和相关药物评价。
缺点:1、痴呆症状可逆;2、东莨菪碱对中枢M受体阻断为非特异性,动物可能出现焦虑、行动迟缓、自主活动增多等干扰行为学评价的不良反应。
评价指标:
1、神经行为学检测: Morris水迷宫实验(定位航行实验、空间探索实验)、避暗实验、新物体识别、巴恩斯迷宫、社交箱、旷场、转棒仪、高架十字迷宫等;
2、Aβ检测:1)ELISA检测Aβ含量(组织匀浆、血浆、脑脊液);2)老年斑组织染色(免疫组化);
3、Tau蛋白检测:WB法测定脑内过磷酸化Tau蛋白水平;
4、病理免疫组化:1)神经元数量;2)小胶质细胞数量;3)星形胶质细胞数量;4)NFTs;
5、大脑海马和皮层中AChE、ChAT活性及ACh含量测定,ELISA(东莨菪碱诱导模型);
6、神经炎症检测;