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将外源分子(如DNA,RNA等)导入细胞的实验技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。常用的化学转染载体有阳离子脂质体、磷酸钙共沉淀、葡聚糖,生物转染载体有腺病毒,逆转录病毒和慢病毒等。
实验流程
1)化学载体
将DNA,RNA,siRNA或寡核苷酸和转染试剂分别在不同的管中稀释→将两者混合形成混合物→将形成的混合物加入细胞中,脂质体的正电荷有助于帮助复合物粘附到细胞膜上→复合物经细胞内吞作用进入细胞→检测基因表达或沉默情况
2)生物载体
通过基因克隆方法获得重组病毒表达载体→转染包装细胞系,扩增并分离得到重组病毒颗粒→纯化并滴定病毒液→转导目的细胞→从培养基中移除病毒→检测基因表达或沉默情况
样品要求
鉴定验证的敲除或过表达载体,或提供鉴定和验证方法。
样品信息
质粒或病毒表达载体信息、转染验证或筛选方法、处理方法等。
报告交付
实验所需试剂、仪器、实验方法、实验结果等。