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材料和方法
实验动物:C57BL/6J,雄性,6周龄,22-24g
造模方法:通过气管内注射博来霉素建立特发性肺纤维化模型,该方法造模较为简便。
(1)小鼠麻醉呈仰卧位姿势,气管居中,暴露颈部,剪毛备皮,无水乙醇消毒后沿颈部中线开口缓慢钝性分离至气管,此时需要轻柔操作,减少因手术操作造成的气管损伤。
(2)使用注射器,针头几乎平行于气管平面,经气管软骨环间隙朝向心端插入气管内,回抽无阻力,则注入少量的博来霉素溶液(不超过0.2 ml/只,肺内大量积液会导致动物的死亡)。
(3)注射完毕后,缝合伤口,后将动物直立1-3 min,适度左右转动,并轻轻按摩小鼠胸部,保证博来霉素在肺内均匀分布,动物清醒后常规饲养。(3天左右即可出现损伤,体重降低等症状)28d后收集样本。
评价指标:
1、体重;
2、肺泡灌洗液炎性细胞计数;
3、肺组织羟脯氨酸含量检测;
4、组织病理学(HE、Masson染色)等