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荧光定量PCR

实时荧光PCR(Quantitative PCR, qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基因,在PCR指数扩增期间实时监测PCR反应体系中的荧光信号强度的变化,利用荧光信号累积,对目的基因进行定量分析的PCR检测技术。与常规PCR相比,实时荧光定量PCR具有特异性强、灵敏度高、污染途径少、检测方法准确等特点,实现了PCR由定性到定量的飞跃。 荧光定量PCR实验可分为SYBR Green I 荧光染料法或TaqMan荧光探针法对样品进行相对定量或绝对定量实验。 隆科生物可提供mRNA、lncRNA、miRNA、siRNA等水平的基因拷贝数变化检测服务。

荧光定量PCR实验可分为SYBR Green I 荧光染料法或TaqMan荧光探针法对样品进行相对定量或绝对定量实验。

隆科生物可提供mRNA、lncRNA、miRNA、siRNA等水平的基因拷贝数变化检测服务。

实验流程

样品制备——核酸提取——引物/探针设计与合成——引物验证——qPCR实验—qPCR上机检测——数据分析——报告出具

样品要求

1) 细胞样品:细胞数≥106,加入Trizol(RNA定量)或直接放置-80℃冰箱,干冰运输。

2) 血液样品:体积≥100μL,放置于-80℃冰箱,干冰运输。

3) 组织样品:总量≥30mg,液氮速冻后放置于-80℃冰箱,干冰运输。

4) DNA样品:总量≥2μg,OD260/OD280在1.7-1.9之间,完整性好,干冰运输。

5) RNA样品:总量≥2 μg,OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好,干冰运输。

6) 反转录的cDNA:总量≥≥2μg,纯度在1.9-2.1之间,完整性好,干冰运输。

样品信息

靶基因信息:GenBank Accession Number或基因序列、物种信息、DNA/RNA来源、基因丰度等。引物可提供或由公司进行设计合成。

报告交付

​实验所需试剂、仪器,试验方法,实验结果等。

荧光定量PCR检测
荧光定量PCR检测
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