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最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)测量抗菌药物的抗菌活性大小的一个指标,指在体外培养细菌18至24h后能抑制培养基内病原菌生长的最低药物浓度。常用的检测方法有纸片法、牛津杯法和二倍稀释法。
1)纸片法也被称作纸片扩散法
是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上,纸片中的药物在琼脂中扩散。在药物扩散的同时,纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长,而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长,从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。不同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而可能不同,抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈越大,MIC越小。
实验流程:制作滤纸片——制备平板——测试菌接种——含有药物的滤纸片放入平板——培养——抑菌圈测定。
2)牛津杯法
将已灭菌的牛津杯置于试验平板中,往杯中注入一定量的待测样品,培养一段时间后测定抑菌圈大小的一种方法。
实验流程:制备平板——测试菌接种——放入牛津杯——加入待测样品——培养——抑菌圈测定。
3)二倍稀释法
凡能抑制试验菌生长的最高药物稀释度为该药的最低抑菌浓度(MIC)。将待检药物先以合适的液体培养基在试管或96孔板内二倍连续稀释,每管内再加入一定量实验菌液,培养后,观察细菌生长情况,与空白对照比较,以肉眼观察培养基清亮且未见细菌生长的最低浓度判定为该药物的最低抑菌浓度。将无细菌生长的药物和菌种划线接种到新的琼脂平板上进行培养,进一步确定该药物的MIC。通常每菌重复3次,求平均值。
实验流程:样品准备——测试菌接种——培养——结果分析。
MIC实验应用领域
1.临床诊断
2.抗生素研发
3.耐药性监测
4.食品安全
5.环境微生物研究