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细胞活力检测方法有哪些?
发布时间:2024-10-17 浏览次数:
细胞活力检测是评估细胞健康状态、增殖能力和代谢活性的重要手段。以下是几种常见的细胞活力检测方法:

1.MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)比色法

MTT能被活细胞线粒体中的脱氢酶还原成不溶于水的蓝紫色甲瓒结晶,并沉积在细胞中。

死亡的细胞不具备此功能,因此甲瓒结晶的生成量与活细胞数量成正比。

通过测定甲瓒结晶的吸光度,可以间接反映活细胞的数量。

2.CCK-8(Cell Counting Kit-8)法

CCK-8试剂中含有WST-8,它在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲瓒产物。

细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。

该方法灵敏度高,对细胞毒性小,适用于快速、高灵敏度的细胞增殖和毒性检测。

3.台盼蓝染色法

台盼蓝是一种常用的细胞活性染料,活细胞不会被台盼蓝染色,而死细胞则会被染成蓝色。

通过显微镜观察细胞是否被染色,可以判断细胞的活性状态。

4.ATP检测法

ATP是细胞内的主要能量来源,其含量可以反映细胞的代谢活性。

通过荧光素酶-荧光素体系检测ATP的发光强度,可以间接评估细胞的活力。

5.乳酸脱氢酶(LDH)释放法

LDH是细胞质中的一种酶,当细胞膜受损时,LDH会释放到细胞外。

通过检测细胞外LDH的活性,可以评估细胞膜的完整性和细胞的损伤程度。

6.流式细胞术

流式细胞术是一种基于激光散射和荧光检测原理的细胞分析技术。

通过标记细胞表面的特定抗原或细胞内的特定分子,可以检测细胞的活性、增殖、凋亡等状态。

7.克隆形成实验

将单个细胞接种在培养皿中,培养一段时间后,观察细胞形成的克隆数量和大小。

克隆形成能力可以反映细胞的增殖潜力和活力。

8.荧光显微镜观察

使用特定的荧光染料标记活细胞或死细胞,通过荧光显微镜观察细胞的荧光强度或形态变化。

这种方法可以提供直观的细胞活力图像。

每种方法都有其适用的场景和限制条件,选择哪种方法取决于实验的具体需求和细胞的特性。在实际操作中,应根据实验目的和细胞类型选择合适的检测方法,并遵循相应的操作指南和注意事项。